公司动态您现在的位置:网站首页> 公司动态> 公司动态>

试剂盒优化的具体表现

发布时间:2021-11-04 10:05:56   点击次数:673次

      

 免疫酶技术(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫测定,是通过酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法,其应用范围极广。显示方法是用酶的特殊底物来处理反应后的标本,通过酶催化底物的显色反应来测定抗原或抗体的存在,以酶标作定量或定性分析。

近年来,EIA技术取得了显著的发展,主要表现在以下方面:

1、继单克隆抗体后的第三代抗体基因工程抗体的应用,明显地提高了检测的特异性,基本消除了抗原、抗体间的非特异xing jiao叉反应,保证了分析的准确性。抗体制备技术的进步,使试剂的生产制备得以规模化,检测范围日益扩展,小分子抗原、半抗原的检测成为事实。

 2、分析方式的改进与多样化提高了试验的敏感性。

(1)除早期的竞争法,间接法外,又发展了双抗原夹心法测抗体,偶联酶标记法测抗原,桥联酶免疫分析,酶放大免疫分析技术等,后者应用了生物素-亲和素系统,底物循环放大系统,酶-抗酶放大系统及酶偶联放大系统等。

(2)由于酶标记技术的进步,标记酶的应用已从过氧化物酶,扩展到碱性磷酸酶,β半乳糖苷酶,尿素酶,葡萄糖6磷酸脱氢酶,葡萄糖氧化酶,苹果酸脱氢酶,至今有二十多种酶被应用于EIA ,但应用比较多的仍然是辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(Alkalinephasphotase,ALP)。

(3)酶免疫分析与其它标记免疫分析相结合如与荧光免疫分析(Fluorescence Immunoassay ,FIA)结合形成荧光酶免疫分析(Fluorescence Enzyme Immunoassay ,FEIA),酶促放大时间分辨荧光免疫分析(Enzyme-am-plified time-resolved fluoroimmunoassay ,EATRFIA),EIA与化学发光免疫分析(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)结合形成酶—化学发光免疫分析,增强化学发光酶免疫分析(ECLEIA)。EIA与聚合酶链反应结合形成的PCR-EIA分析等。

(4)改进固相载体的技术

传统ELISA应用的固相载体是聚苯乙稀微孔板,聚苯乙烯珠或条,后发展为硝酸纤维素膜、活化滤纸、硅片、尼龙、利用高分子材料合成的各种固相微粒等。为提高固相表面的结合容量,增加结合物的范围而改造聚苯乙烯的表面,如用化学偶联法导入功能性醛基、酰基、烷胺基等以更好地与蛋白质,多肽的羧基结合,用位点导向性共价偶联法引入亲和素,蛋白A,多聚赖氨酸等,以牢固地捕获蛋白或多肽,超平整聚苯乙烯表面的制备,克服了表面粗糙带来的不均一性,达到平均粗糙度只有2A+的超平整平面,实现了对蛋白的结合容量大,脱附率低,孔间均一性好,使试验精密度达5%。

应用于双抗体夹心法时,聚苯乙烯经射线照射后,可以增加其吸附性能特别是对免疫球蛋白的吸附性能。近年美国Corning公司研制成功表面经琥珀酰亚胺酯活化酶标板,其质量达到氨基活化相似水平。

(5)分析方法的创新 如同步ELISA法测定多种抗体是将抗原包被在与微孔相匹配的钉板的钉子上,盖上钉板的同时与微孔内的所需标本、试剂反应,是又一种改良ELISA。利用抗体和抗抗体能形成多层复合物的特性,将常规二步温育法改为一步温育测定法,使检测时间大为缩短,现在已广为应用。


上海科顺生物科技有限公司

上海科顺生物科技有限公司

地址:上海市浦东新区张杨北路5972号

主营产品:elisa试剂盒,人elisa试剂盒,标准品,抗体

© 2020 版权所有:上海科顺生物科技有限公司  备案号:沪ICP备17012044号-1  站点地图

联系方式

18721729907

021-60520062